章鱼肉碱标准样品的研制（二）

  2.  结果与讨论

  2.1  章鱼肉碱的定性分析

  章鱼肉碱通过红外光谱、 高分辨质谱及核磁共振谱进行定性分析。

  2.1.1  章鱼肉碱的红外光谱分析

  将章鱼肉碱与溴化钾干燥后研匀， 压片后放入红外光谱仪进行扫描， 获得相应红外光谱数据见表2。表 2 详细列出了样品的红外光谱数据及归属。其中 3399， 3181， 3013 cm^–1 为羧基和胺基的伸缩振动； 2835， 1360 cm^–1 为亚甲基的伸缩振动和弯曲振动； 1687， 1631 cm^–1 为胍基的碳氮双键伸缩振动和—NH₂ 的弯曲振动。

  2.1.2  章鱼肉碱的高分辨质谱分析

  高分辨质谱测得章鱼肉碱加氢离子质量数为 247.140 1， 与理论值 (247.140 0) 相符。

  2.1.3  章鱼肉碱的核磁共振谱分析

  对该样品进行 NMR 测试， 核磁数据见表 3， 与文献报道的章鱼肉碱 ¹H NMR 和 ¹³C NMR 图谱等数据一致。从样品的红外光谱、 高分辨质谱和NMR 谱证明了所研制的样品是章鱼肉碱， 结构式见图 1。

  2.2  章鱼肉碱的定量分析方法选择

  章鱼肉碱的检测方法有液相色谱法、 毛细管电泳分析、 酶技术测定等， 其中液相色谱法是zui常用的一种方法。章鱼肉碱属于胍类化合物， 存在极性大、 紫外末端吸收等特点， 此类化合物的定量检测常用柱前或柱后衍生液相色谱法。由于章鱼肉碱含有氨基和羧基， 可采用1,2-萘醌-4-磺酸钠、 二苯乙醇酮及茚三酮作为衍生试剂，通过衍生化方法提高反相液相色谱法的准确度、 灵敏度。目前， 章鱼肉碱的检测方法尚无统一的国家标准或行业标准。离子色谱具有灵敏度高、 分离度高、 无需衍生化等优点， 因此采用离子色谱对章鱼肉碱样品定值。

  2.3  均匀性试验

  标准样品的均匀性检验是标准样品研制过程中*的程序， 因此在对样品进行分装后， 对章鱼肉碱标准样品进行纯度均匀性检验， 均匀性检验结果见表 4 与表 5。

  统 计 量 F = MS_among ／MS_within = 6.278×10^–7 ／ 3.107×10^–7 = 2.02， F_{(0.05， 14， 30)} = 2.04， F ＜ F_{(0.05， 14， 30)} ，说明在 95% 的置信区间内， 章鱼肉碱样品均匀性良好。