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更多关于小鼠胚胎成纤维细胞的知识

更新时间:2022-08-11      点击次数:999
  小鼠胚胎成纤维细胞用于支持鼠和人多功能干细胞的生长。该细胞不仅能提供多能性干细胞生长的物质,也能分泌维持干细胞多能性的关键生长因子。该细胞从大鼠胚胎中分离,并在早期起作用。作为饲养层细胞,必须通过辐射阻止该细胞的增殖。经处理的细胞也能用于产生有用的培养基,用于自由饲养的多能性干细胞的培养。  
  小鼠胚胎成纤维细胞培养方法:
 
  传代方法 将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约3min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养;
 
  生长条件 :37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10�S。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,丙酮酸钠。
 
  存储条件:冻存则用6mL冻存液(90�S+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜移至液氮中保存。
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